دانلود پایان نامه : بررسی ارتباط چند شکلیهای ژنتیکی GPX1 pro198leu و SOD1 A251G با خطر رد حاد پیوند کلیه |
شاهد و بیمار و دارای رد پیوند و فاقد رد حاد پیوند مشاهده نشد. نتایج نشان میدهند که چندشکلی SOD1 A251G در ابتلا به بیماریهای منجر به پیوند کلیه و همینطور رد حاد پیوند دخیل نیست.
واژگان کلیدی: پیوند کلیه، رد حاد، استرس اکسیداتیو، GPX1، SOD1
شاهد و بیمار و دارای رد پیوند و فاقد رد حاد پیوند مشاهده نشد. نتایج نشان میدهند که چندشکلی SOD1 A251G در ابتلا به بیماریهای منجر به پیوند کلیه و همینطور رد حاد پیوند دخیل نیست.
واژگان کلیدی: پیوند کلیه، رد حاد، استرس اکسیداتیو، GPX1، SOD1
فهرست مطالب
عنوان صفحه
فصل اول: مقدمه
1-1- پیوندکلیه ……………………………………………………………………………………………………………….
2
1-2- رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………
3
1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………
3
1-2-2- رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..
4
1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………
4
1-3- پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………
5
1-4- استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….
7
1-5- گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..
8
1-6- سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….
9
1-7- هدف ………………………………………………………………………………………………………………………
11
1-8- فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….
11
فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده
2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 Pro198leu و ارتباط آن با بیماریهای گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………
13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..
14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ………………………………………………………..
15
فصل سوم: مواد و روش انجام کار
3-1- نمونهگیری …………………………………………………………………………………………………………………
18
3-2- وسایل مورد استفاده ………………………………………………………………………………………………….
19
3-3- مواد مورد استفاده ……………………………………………………………………………………………………..
19
3-3-1- محلولهای لازم جهت استخراج ………………………………………………………………………
19
3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ……………………………………………………………….
20
3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ………………………………………………………..
20
3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده …………………………………..
20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ……………….
21
3-4-1- ساخت محلولهای مورد نیاز جهت استخراج …………………………………………………..
21
3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن ………………………………………………………………….
21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش PCR-RFLP ………………………………………………………………………
21
3-5-1- PCR …………………………………………………………………………………………………………………
21
3-5-2- پرایمرهای مورد استفاده …………………………………………………………………………………..
22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ………………………………………………..
23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G ……………………………………………………..
24
3-8- الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………….
25
3-9- رنگآمیزی ژل …………………………………………………………………………………………………………..
26
3-10- تحلیل آماری
…………………………………………………………………………………………………………..
27
فصل چهارم: نتایج
4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش …………………………………………………………
29
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………
29
4-3- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیماران ……………………….
31
4-4- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………
33
4-5- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A251G درافراد سالم و بیماران ……………………………..
36
4-6- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………………
38
4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلیهای GPX1 Pro198leu و SOD1 A251G ………….
40
فصل پنجم: بحث و نتیجهگیری
5-1- بحث و نتیجهگیری …………………………………………………………………………………………………….
43
5-2- پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………….
47
فهرست منابع …………………………………………………………………………………………………………………….
48
فهرست جدولها
عنوان صفحه
جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه ……………………………………………………………………………..
18
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ……………………………………………………………………….
22
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن GPX1 در 26 سیکل ……………………….
23
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………..
24
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن SOD1 در 30 سیکل ……………………….
24
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکی SOD1A251G ……………………………………………………………………………………………………………………..
25
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند …………………………………………………………………………
30
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند ……………………………………………………………
30
جدول 4-3: ارتباط سن در رد پیوند کلیه ………………………………………………………………………….
31
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیمار ………………………………………………………………………………………………………………………………………
32
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن GPX1 بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
32
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………….
33
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن GPX1 در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
34
جدول 4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن GPX1 ……………………………..
35
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد سالم و بیمار ..
36
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن SOD1 در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
37
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
38
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن SOD1 در بین گروه دارا و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………………..
39
جدول 4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن SOD1 ……………………………
40
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلیهایGPX1 و SOD1 در افراد سالم و بیمار ………….
41
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلیهایGPX1 و SOD1 در بیماران دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………………………..
41
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیتهای متفاوت ……………………………………………………………….
45
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیتهای متفاوت …………………………………………………………….
46
فهرست شکلها
عنوان صفحه
شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیونپراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………
9
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلی SOD1 A251G
10
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی GPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
26
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی SOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
27
مقدمه
1-1– پیوند کلیه
پیوند به معنی جابهجا کردن سلولها، بافتها یا اندامهای انسانی از یک فرد اهداکننده به یک فرد گیرنده با هدف بازگرداندن عملکرد یا عملکردهایی به بدن است. به مجموع این سلولها، بافتها و اندامها، پیوند یا گرافت[1] گفته میشود، که انواع متفاوتی دارد. پیوند از یک فرد به خودش پیوند اتولوگ[2]، بین افرادی یکسان از نظر ژنتیکی پیوند همژن[3]، بین دو فرد از یک گونه پیوند آلوژن[4] و بین افرادی از گونههای متفاوت پیوند زنوژن[5] گفته میشود (Abbas et al, 2011).
استفاده از روش درمانی پیوند اعضا برای بیماریهای انسانی در نیمقرن گذشته افزایش قابل توجهی داشته است. از میان اندامها قلب، کلیه، کبد، ریه، پانکراس، روده و تیموس و از میان بافتها
فهرست مطالب
عنوان صفحه
فصل اول: مقدمه
1-1- پیوندکلیه ……………………………………………………………………………………………………………….
2
1-2- رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………
3
1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………
3
1-2-2- رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..
4
1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………
4
1-3- پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………
5
1-4- استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….
7
1-5- گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..
8
1-6- سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….
9
1-7- هدف ………………………………………………………………………………………………………………………
11
1-8- فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….
11
فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده
2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 Pro198leu و ارتباط آن با بیماریهای گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………
13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..
14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ………………………………………………………..
15
فصل سوم: مواد و روش انجام کار
3-1- نمونهگیری …………………………………………………………………………………………………………………
18
3-2- وسایل مورد استفاده ………………………………………………………………………………………………….
19
3-3- مواد مورد استفاده ……………………………………………………………………………………………………..
19
3-3-1- محلولهای لازم جهت استخراج ………………………………………………………………………
19
3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ……………………………………………………………….
20
3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ………………………………………………………..
20
3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده …………………………………..
20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ……………….
21
3-4-1- ساخت محلولهای مورد نیاز جهت استخراج …………………………………………………..
21
3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن ………………………………………………………………….
21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش PCR-RFLP ………………………………………………………………………
21
3-5-1- PCR …………………………………………………………………………………………………………………
21
3-5-2- پرایمرهای مورد استفاده …………………………………………………………………………………..
22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ………………………………………………..
23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G ……………………………………………………..
24
3-8- الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………….
25
3-9- رنگآمیزی ژل …………………………………………………………………………………………………………..
26
3-10- تحلیل آماری …………………………………………………………………………………………………………..
27
فصل چهارم: نتایج
4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش …………………………………………………………
29
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………
29
4-3- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیماران ……………………….
31
4-4- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………
33
4-5- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A251G درافراد سالم و بیماران ……………………………..
36
4-6- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………………
38
4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلیهای GPX1 Pro198leu و SOD1 A251G ………….
40
فصل پنجم: بحث و نتیجهگیری
5-1- بحث و نتیجهگیری …………………………………………………………………………………………………….
43
5-2- پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………….
47
فهرست منابع …………………………………………………………………………………………………………………….
48
فهرست جدولها
عنوان صفحه
جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه ……………………………………………………………………………..
18
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ……………………………………………………………………….
22
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن GPX1 در 26 سیکل ……………………….
23
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………..
24
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن SOD1 در 30 سیکل ……………………….
24
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های چندشکلی ژنتیکی SOD1A251G ……………………………………………………………………………………………………………………..
25
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند …………………………………………………………………………
30
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند ……………………………………………………………
30
جدول 4-3: ارتباط سن در رد پیوند کلیه ………………………………………………………………………….
31
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیمار ………………………………………………………………………………………………………………………………………
32
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن GPX1 بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
32
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………….
33
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن GPX1 در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
34
جدول 4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن GPX1 ……………………………..
35
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد سالم و بیمار ..
36
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن SOD1 در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
37
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
38
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن SOD1 در بین گروه دارا و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………………..
39
جدول 4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن SOD1 ……………………………
40
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلیهایGPX1 و SOD1 در افراد سالم و بیمار ………….
41
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلیهایGPX1 و SOD1 در بیماران دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………………………..
41
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیتهای متفاوت ……………………………………………………………….
45
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیتهای متفاوت …………………………………………………………….
46
فهرست شکلها
عنوان صفحه
شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیونپراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………
9
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلی SOD1 A251G
10
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی GPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
26
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی SOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
27<p> </p><p><a href="http://homatez.com/%d8%af%d8%a7%d9%86%d9%84%d9%88%d8%af-%d9%be%d8%a7%db%8c%d8%a7%d9%86-%d9%86%d8%a7%d9%85%d9%87-%d8%a8%d8%b1%d8%b1%d8%b3%db%8c-%d8%a7%d8%b1%d8%aa%d8%a8%d8%a7%d8%b7-%da%86%d9%86%d8%af-%d8%b4%da%a9%d9%84/"><img class="alignnone wp-image-170859″ src="https://arshadfile.ir/wp-content/uploads/2019/08/ddsd_001-268x300-268x300.png” alt="برای دانلود متن کامل پایان نامه ها اینجا کلیک کنید” width="206″ height="230″ /></a></p>
مقدمه
1-1– پیوند کلیه
پیوند به معنی جابهجا کردن سلولها، بافتها یا اندامهای انسانی از یک فرد اهداکننده به یک فرد گیرنده با هدف بازگرداندن عملکرد یا عملکردهایی به بدن است. به مجموع این سلولها، بافتها و اندامها، پیوند یا گرافت[1] گفته میشود، که انواع متفاوتی دارد. پیوند از یک فرد به خودش پیوند اتولوگ[2]، بین افرادی یکسان از نظر ژنتیکی پیوند همژن[3]، بین دو فرد از یک گونه پیوند آلوژن[4] و بین افرادی از گونههای متفاوت پیوند زنوژن[5] گفته میشود (Abbas et al, 2011).
استفاده از روش درمانی پیوند اعضا برای بیماریهای انسانی در نیمقرن گذشته افزایش قابل توجهی داشته است. از میان اندامها قلب، کلیه، کبد، ریه، پانکراس، روده و تیموس و از میان بافتها
[دوشنبه 1398-07-15] [ 09:54:00 ب.ظ ]
|