شاهد و بیمار و دارای رد پیوند و فاقد رد حاد پیوند مشاهده نشد. نتایج نشان می­دهند که چندشکلی SOD1 A251G در ابتلا به بیماری­های منجر به پیوند کلیه و همین­طور رد حاد پیوند دخیل نیست.

 

واژگان کلیدی: پیوند کلیه، رد حاد، استرس اکسیداتیو، GPX1، SOD1

 

 

شاهد و بیمار و دارای رد پیوند و فاقد رد حاد پیوند مشاهده نشد. نتایج نشان می­دهند که چندشکلی SOD1 A251G در ابتلا به بیماری­های منجر به پیوند کلیه و همین­طور رد حاد پیوند دخیل نیست.

 

واژگان کلیدی: پیوند کلیه، رد حاد، استرس اکسیداتیو، GPX1، SOD1

 

 

 

 

 

 

فهرست مطالب

 

عنوان                                                                                                صفحه

 

فصل اول: مقدمه

1-1-       پیوندکلیه ……………………………………………………………………………………………………………….
2
1-2-       رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………
3
   1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………
3
   1-2-2-  رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..
4
   1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………
4
1-3-       پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………
5
1-4-       استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….
7
1-5-       گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..
8
1-6-       سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….
9
1-7-       هدف ………………………………………………………………………………………………………………………
11
1-8-       فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….
11
 

فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 Pro198leu و ارتباط آن با بیماری­های گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………
  

13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری­ های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..
  

14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ………………………………………………………..
15
 

فصل سوم: مواد و روش انجام کار

3-1- نمونه­گیری …………………………………………………………………………………………………………………
18
3-2- وسایل مورد استفاده ………………………………………………………………………………………………….
19
3-3- مواد مورد استفاده ……………………………………………………………………………………………………..
19
   3-3-1- محلول­های لازم جهت استخراج ………………………………………………………………………
19
   3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ……………………………………………………………….
20
   3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ………………………………………………………..
20
   3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده …………………………………..
20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ……………….
21
   3-4-1- ساخت محلول­های مورد نیاز جهت استخراج …………………………………………………..
21
   3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن ………………………………………………………………….
21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش  PCR-RFLP ………………………………………………………………………
21
   3-5-1- PCR …………………………………………………………………………………………………………………
21
   3-5-2- پرایمر­های مورد استفاده …………………………………………………………………………………..
22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ………………………………………………..
23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G ……………………………………………………..
24
3-8- الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………….
25
3-9- رنگ­آمیزی ژل …………………………………………………………………………………………………………..
26
3-10- تحلیل آماری

 

برای دانلود متن کامل پایان نامه ها اینجا کلیک کنید

…………………………………………………………………………………………………………..
27
 

فصل چهارم: نتایج

4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش …………………………………………………………
29
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………
29
4-3- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیماران ……………………….
31
4-4- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………
  

33
4-5- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A251G درافراد سالم و بیماران ……………………………..
36 

 
4-6- بررسی چند شکلی ژن  SOD1 A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………………
  

38
4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلی­های GPX1 Pro198leu و SOD1 A251G …………. 

 
40
فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری

5-1- بحث و نتیجه­گیری …………………………………………………………………………………………………….
43
5-2- پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………….
47
 

فهرست منابع …………………………………………………………………………………………………………………….
48
 

فهرست جدول­ها

 

عنوان                                                                                             صفحه

 

جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه ……………………………………………………………………………..
18
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ……………………………………………………………………….
22
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن GPX1 در 26 سیکل ……………………….
23
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های  چندشکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………..
  

24
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن SOD1 در 30 سیکل ……………………….
24
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های  چندشکلی ژنتیکی SOD1A251G ……………………………………………………………………………………………………………………..
  

25
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند …………………………………………………………………………
30
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند ……………………………………………………………
30
جدول 4-3:  ارتباط سن در رد پیوند کلیه ………………………………………………………………………….
31
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیمار ………………………………………………………………………………………………………………………………………
  

32
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  GPX1  بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
  

32
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………….
  

33
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  GPX1  در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
  

34
جدول  4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن GPX1 ……………………………..
35
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد سالم و بیمار ..
36 

 
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  SOD1 در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
  

37
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
  

38
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  SOD1  در بین گروه دارا و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………………..
  

39
جدول  4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن SOD1 ……………………………
40
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1  و SOD1  در افراد سالم و بیمار ………….
41
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1  و SOD1  در بیماران دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………………………..
  

41
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیت­های متفاوت ……………………………………………………………….
45
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیت­های متفاوت …………………………………………………………….
46
فهرست شکل­ها

عنوان                                                                                        صفحه

 

شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیون­پراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………
  

9
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلی SOD1 A251G
10
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی GPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
  

26
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی SOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
  

27
مقدمه

 

 

1-1– پیوند کلیه

 

پیوند به معنی جابه­جا کردن سلول­ها، بافت­ها یا اندام­های انسانی از یک فرد اهداکننده به یک فرد گیرنده با هدف بازگرداندن عملکرد یا عملکردهایی به بدن است. به مجموع این سلول­ها، بافت­ها و اندام­­ها، پیوند یا گرافت[1] گفته می­شود، که انواع متفاوتی دارد. پیوند از یک فرد به خودش پیوند اتولوگ[2]، بین افرادی یکسان از نظر ژنتیکی پیوند هم­ژن[3]، بین دو فرد از یک گونه پیوند آلوژن[4] و بین افرادی از گونه­های متفاوت پیوند زنوژن[5] گفته می­شود (Abbas et al, 2011).

استفاده از روش درمانی پیوند اعضا برای بیماری­های انسانی در نیم­قرن گذشته افزایش قابل توجهی داشته است. از میان اندام­ها قلب، کلیه، کبد، ریه، پانکراس، روده و تیموس و از میان بافت­ها

 

 

 

 

فهرست مطالب

 

عنوان                                                                                                صفحه

 

فصل اول: مقدمه

1-1-       پیوندکلیه ……………………………………………………………………………………………………………….
2
1-2-       رد پیوند …………………………………………………………………………………………………………………
3
   1-2-1- رد فوق حاد ………………………………………………………………………………………………………
3
   1-2-2-  رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………..
4
   1-2-3- رد مزمن ……………………………………………………………………………………………………………
4
1-3-       پیشگیری از رد آلوگرافت ………………………………………………………………………………………
5
1-4-       استرس اکسیداتیو ………………………………………………………………………………………………….
7
1-5-       گلوتاتیون پراکسیداز 1 (GPX1) …………………………………………………………………………..
8
1-6-       سوپراکسیددسموتاز1 (SOD1) …………………………………………………………………………….
9
1-7-       هدف ………………………………………………………………………………………………………………………
11
1-8-       فرضیه …………………………………………………………………………………………………………………….
11
 

فصل دوم: مروری بر تحقیقات انجام شده

2-1- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی GPX1 Pro198leu و ارتباط آن با بیماری­های گوناگون ……………………………………………………………………………………………………………
  

13
2-2- مطالعات انجام شده بر روی چند شکلی SOD1 A251G و ارتباط آن با بیماری­ های گوناگون………………………………………………………………………………………………………………………..
  

14
2-3- مطالعات انجام شده بر روی رد حاد پیوند کلیه ………………………………………………………..
15
 

فصل سوم: مواد و روش انجام کار

3-1- نمونه­گیری …………………………………………………………………………………………………………………
18
3-2- وسایل مورد استفاده ………………………………………………………………………………………………….
19
3-3- مواد مورد استفاده ……………………………………………………………………………………………………..
19
   3-3-1- محلول­های لازم جهت استخراج ………………………………………………………………………
19
   3-3-2- مواد استفاده شده جهت انجام PCR ……………………………………………………………….
20
   3-3-3- مواد استفاده شده جهت انجام الکتروفورز ………………………………………………………..
20
   3-3-4- مواد استفاده شده جهت اثر دادن آنزیم محدود کننده …………………………………..
20
3-4- استخراج DNA به روش جوشاندن (Boiling) ………………………………….. ……………….
21
   3-4-1- ساخت محلول­های مورد نیاز جهت استخراج …………………………………………………..
21
   3-4-2- فرآیند استخراج به روش جوشاندن ………………………………………………………………….
21
3-5- تعیین ژنوتیپ با روش  PCR-RFLP ………………………………………………………………………
21
   3-5-1- PCR …………………………………………………………………………………………………………………
21
   3-5-2- پرایمر­های مورد استفاده …………………………………………………………………………………..
22
3-6- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی GPX1pro198leu ………………………………………………..
23
3-7- تعیین ژنوتیپ برای چند شکلی SOD1A251G ……………………………………………………..
24
3-8- الکتروفورز ………………………………………………………………………………………………………………….
25
3-9- رنگ­آمیزی ژل …………………………………………………………………………………………………………..
26
3-10- تحلیل آماری …………………………………………………………………………………………………………..
27
 

فصل چهارم: نتایج

4-1- مشخصات افراد شرکت کننده در این پژوهش …………………………………………………………
29
4-2- بررسی عوامل خطر دخیل در رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………
29
4-3- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیماران ……………………….
31
4-4- بررسی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………
  

33
4-5- بررسی چند شکلی ژن SOD1 A251G درافراد سالم و بیماران ……………………………..
36 

 
4-6- بررسی چند شکلی ژن  SOD1 A252G در بیماران دارای رد حاد و فاقد رد حاد پیوند کلیه ……………………………………………………………………………………………………………………………
  

38
4-7- بررسی همزمان اثر چند شکلی­های GPX1 Pro198leu و SOD1 A251G …………. 

 
40
فصل پنجم: بحث و نتیجه­گیری

5-1- بحث و نتیجه­گیری …………………………………………………………………………………………………….
43
5-2- پیشنهادات ………………………………………………………………………………………………………………….
47
 

فهرست منابع …………………………………………………………………………………………………………………….
48
 

فهرست جدول­ها

 

عنوان                                                                                             صفحه

 

جدول3-1: مشخصات افراد مورد مطالعه ……………………………………………………………………………..
18
جدول 3-2: مواد مورد نیاز برای انجام PCR ……………………………………………………………………….
22
جدول3-3: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن GPX1 در 26 سیکل ……………………….
23
جدول3-4: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های  چندشکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………..
  

24
جدول3-5: برنامه تنظیم شده PCR برای تکثیر ژن SOD1 در 30 سیکل ……………………….
24
جدول3-6: قطعات حاصل از هضم آنزیمی برای ژنوتیپ های  چندشکلی ژنتیکی SOD1A251G ……………………………………………………………………………………………………………………..
  

25
جدول 4-1: رابطه جنسیت و رد حاد پیوند …………………………………………………………………………
30
جدول 4-2: رابطه گروه خونی، RH و رد حاد پیوند ……………………………………………………………
30
جدول 4-3:  ارتباط سن در رد پیوند کلیه ………………………………………………………………………….
31
جدول 4-4: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد سالم و بیمار ………………………………………………………………………………………………………………………………………
  

32
جدول 4-5: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  GPX1  بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
  

32
جدول 4-6: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن GPX1 Pro198leu درافراد فاقد ودارای رد حاد ……………………………………………………………………………………………………………………….
  

33
جدول 4-7: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  GPX1  در بین گروه دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
  

34
جدول  4-8: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن GPX1 ……………………………..
35
جدول 4-9: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد سالم و بیمار ..
36 

 
جدول 4- 10: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  SOD1 در بین گروه سالم و بیماران پیوند کلیه ………………………………………………………………………………………………………………..
  

37
جدول 4-11: فراوانی ژنوتیپی و آللی چند شکلی ژن SOD1 A252Gدرافراد دارای رد حاد و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………
  

38
جدول 4- 12: آنالیز توزیع فراوانی های ژنوتیپی و آللی ژن  SOD1  در بین گروه دارا و فاقد رد حاد …………………………………………………………………………………………………………………………..
  

39
جدول  4-13: رابطه منبع بافتی جسد و رد حاد پیوند برای ژن SOD1 ……………………………
40
جدول 4-14: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1  و SOD1  در افراد سالم و بیمار ………….
41
جدول 4-15: اثر همزمان چند شکلی­هایGPX1  و SOD1  در بیماران دارا و فاقد رد حاد ………………………………………………………………………………………………………………………………………..
  

41
جدول5-1: فراوانی آللT در جمعیت­های متفاوت ……………………………………………………………….
45
جدول5-2: فراوانی آلل G در جمعیت­های متفاوت …………………………………………………………….
46
فهرست شکل­ها

عنوان                                                                                        صفحه

 

شکل 1-1- ساختار ژنتیکی گلوتاتیون­پراکسیداز یک و چند شکلی ژنتیکی GPX1pro198leu ………………………………………………………………………………………………………………
  

9
شکل 1-2- ساختار ژنتیکی سوپراکسید دسموتاز یک و چندشکلی SOD1 A251G
10
شکل 3-1:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی GPX1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
  

26
شکل 3-2:نتایج حاصل از PCR -RFLPچند شکلی ژنتیکی SOD1قابل مشاهده بر روی ژل آگاروز ……………………………………………………………………………………………………………………………..
  

27<p>&nbsp;</p><p><a href="http://homatez.com/%d8%af%d8%a7%d9%86%d9%84%d9%88%d8%af-%d9%be%d8%a7%db%8c%d8%a7%d9%86-%d9%86%d8%a7%d9%85%d9%87-%d8%a8%d8%b1%d8%b1%d8%b3%db%8c-%d8%a7%d8%b1%d8%aa%d8%a8%d8%a7%d8%b7-%da%86%d9%86%d8%af-%d8%b4%da%a9%d9%84/"><img class="alignnone wp-image-170859″ src="https://arshadfile.ir/wp-content/uploads/2019/08/ddsd_001-268x300-268x300.png” alt="برای دانلود متن کامل پایان نامه ها اینجا کلیک کنید” width="206″ height="230″ /></a></p>
مقدمه

 

 

1-1– پیوند کلیه

 

پیوند به معنی جابه­جا کردن سلول­ها، بافت­ها یا اندام­های انسانی از یک فرد اهداکننده به یک فرد گیرنده با هدف بازگرداندن عملکرد یا عملکردهایی به بدن است. به مجموع این سلول­ها، بافت­ها و اندام­­ها، پیوند یا گرافت[1] گفته می­شود، که انواع متفاوتی دارد. پیوند از یک فرد به خودش پیوند اتولوگ[2]، بین افرادی یکسان از نظر ژنتیکی پیوند هم­ژن[3]، بین دو فرد از یک گونه پیوند آلوژن[4] و بین افرادی از گونه­های متفاوت پیوند زنوژن[5] گفته می­شود (Abbas et al, 2011).

استفاده از روش درمانی پیوند اعضا برای بیماری­های انسانی در نیم­قرن گذشته افزایش قابل توجهی داشته است. از میان اندام­ها قلب، کلیه، کبد، ریه، پانکراس، روده و تیموس و از میان بافت­ها

موضوعات: بدون موضوع  لینک ثابت